N,N-亚甲基双丙烯酰胺
中文名称：N,N-亚甲基双丙烯酰胺
其他中文名称：甲叉双丙烯酰胺；双丙烯酰胺；N，N'-甲叉双丙烯酰胺；次甲基双丙烯酰胺；N，N'-甲撑双丙烯酰胺；N,N-亚甲基二丙烯酰胺；N,N’-亚甲基双(2-丙烯酰胺)
英文名称： MBA
其他英文名称： BIS；NAPP；N，N-Methylene Bisacrylamide；BIS-Acrylamide；N,N-Methylene-bis-acrylamide；N,N'-Methylenebis(2-propenamide)
产品规格： 高纯，99%
包装：25克/100克/500克
CAS号：110-26-9
C7H10N2O2=154.17
N,N-亚甲基双丙烯酰胺级别：High purity grade
含量：≥99.0%
pH (1%, 0.1M NaCl) @25C：＞5.0
吸光度Abs.@290nm (1%, Water)：≤0.2%
丙烯酸Acrylic Acid：≤0.001%
导电率Conductivity (2%, Water)(umhos)：≤5
DNase(P/F)：无
RNase(P/F)：无
蛋白酶Protease(P/F)：无
性状：白色结晶粉末，无味，吸湿性极小。遇高温或强光则自交联，微溶于水、乙醇。溶于水和水的丙酮的混合液。20℃时水中可溶0.31g/ml，水溶液可因水解而形成丙烯酸和氨。熔点>300℃。中等毒，半数致死量(大鼠，经口)390mg/kg。有刺激性。本品因有取代基丙烯酰胺，因此具有一定的毒性。能轻微刺激眼睛、皮肤和粘膜。应避免与人体长时间直接接触。误触应用清水洗净
N,N-亚甲基双丙烯酰胺用途：生化研究。生物高分子化合物(蛋白质、多肽、核酸)的分离。聚丙烯酰胺凝胶技术和临床检验。与丙烯酰胺共聚可制成油田压裂液，与某种单体共聚制取不溶性树脂，可用作堵水灌浆材料。亦可用作制备聚丙烯酰胺凝胶的交联剂。用于生产印染助剂、餐巾、保健用尿布和其它工业所用的高吸水树脂。临床检验是分离氨基酸的重要材料。在地下建筑中，AAM、MBA注入土层所形成的不溶性凝胶对土层进行强化，防止渗水。加入混凝土可缩短混凝土的养护，提高耐水性。另外MBA在电子、造纸、印刷制版、合成树脂改性以及涂料、粘合剂等方面也广泛应用
保存：RT，避光
N,N-亚甲基双丙烯酰胺内容及其配制
N,N-亚甲基双丙烯酰胺自备材料
1）蒸馏水。
2）加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3）振荡器及磁力搅拌器等。
N,N-亚甲基双丙烯酰胺安全性
1）避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
2）实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3）不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
N,N-亚甲基双丙烯酰胺操作注意事项
1）试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
2）实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
3）不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4）使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
5）使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6）洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7）底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8）加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9）按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
N,N-亚甲基双丙烯酰胺样品收集、处理及保存方法
1）血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2）血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3）细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4）组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液
5）保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
N,N-亚甲基双丙烯酰胺试剂的准备
1）标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。
2）洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。
N,N-亚甲基双丙烯酰胺操作步骤
1）使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。
2）根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。
3）加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。
4）甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
5）每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
6）甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
7）每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。
8）取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。
9）在450nm波长处测定各孔的OD值。
N,N-亚甲基双丙烯酰胺局限
6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到精确的结果。
N,N-亚甲基双丙烯酰胺性能
1. 灵敏度：最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性：不与其它细胞因子反应。
3. 重复性：板内、板间变异系数均小于10%。
N,N-亚甲基双丙烯酰胺结果判断与分析
1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值
2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的待测物质标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的待测物质含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。
