ELISA试剂盒的样品处理注意要点

[2016-03-22]

 在ELISA试剂盒中一般有3次加样步聚，即加标本，加酶结合物，加底物。加样时应将所加物加在ELISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可溅出，不可产生气泡。加标本一般用微量加样器，按规定的量加入板孔中。每次加标本应更换吸嘴，以免发生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加样。
    有此测定（如间接法ELISA）需用稀释的血清，可在试管中按规定的稀释度稀释后再加样。也可在板孔中加入稀释液，再在其中加入血清标本，然后在微型震荡器上震荡1分钟以保证混和。小鼠ELISA试剂盒加酶结合物应用液和底物应用液时可用定量多道加液器，使加液过程迅速完成。应当注意以下几点
1．血清：
标本请于室温放置2小时或4℃过液后于1000g，4℃离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
2．细胞培养物上清：
细胞培养物于室温1000g，离心10分钟后收集上清，并将标本保存于-20℃，且应避免反复冻融。
3．组织匀浆：
将组织标本先用PBS洗涤，除去多余血液，匀浆化后放在PBS于-20℃放置过液，再经过二次反复冻融破膜，5000g，4℃离心5分钟，取上清即可检测。
4．血浆：
ELISA试剂盒可用EDTA或肝素作为抗凝剂标本采集后30分钟内于2-8℃,1000g离心15分钟，ELISA试剂盒或将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
5．尿液：
无菌收集取初尿，离心除去沉淀物，即可用于检测，要长期保存尿样，可以加入0.05％的NaN3在4-8℃保存，或加入尿样冰冻保护液放入-20℃冰箱长期保存。