ELISA试剂盒实验的准确度

[2016-03-15]

近刚做了下ELISA实验，把各种ELISA试剂盒配置方法如下：ELISA试剂盒实验中是以抗原和抗体的免疫反应为基础，ELISA试剂盒以及各种溶液如何配置?(1) ELISA试剂盒实验包被缓冲液(2) ELISA实验洗涤缓冲液(2)ELISA试剂盒实验洗涤缓冲液(3) ELISA试剂盒实验稀释液;(4)ELISA试剂盒实验终止液(5)ELISA试剂盒底物缓冲液(6)ELISA实验TMB(四甲基联苯胺)使用液(7) ELISA实验ABTS使用液(8)ELISA试剂盒。ELISA试剂盒的试剂盒说明上写封闭液用蔗糖溶液，一般是用BSA或酪蛋白的蛋白分子封闭空白位点，蔗糖封闭的原理：
1、ELISA试剂盒实验中，蔗糖本身没有封闭作用;
2、封闭液一般是BSA、酪蛋白等或者是Tween等。
3、加蔗糖的主要目的是保护ELISA板子吸附(包被)的蛋白，起到“保护剂"的作用。
4、蔗糖溶液一般在ELISA试剂盒板子经过BSA封闭后加，当然也有将蔗糖加到封闭液中同时进行处理;那一种更好需要你实验后来验证。但多数选择前者。
    封闭剂还可用5%的脱脂乳(市售即可)，0.4%的明胶，但是实验表明前者比较好，后者不容易洗干净未结合上的明胶。
封闭剂的原理就是与酶联板上未结合抗原或抗体的微孔中用封闭剂封闭上，结合抗体或抗原的时候就不会产生非特异结合了。